Добавить в избранное
Лечение печени Все про лечение печени

Анализ пцр гепатит отрицательный

ПЦР гепатита С

  • 1 Что такое ПЦР?
  • 2 Виды метода ПЦР
  • 3 Особенности количественного ПЦР анализа
  • 4 Показания
  • 5 Для чего проводится на различных этапах течения болезни?
  • 6 Расшифровка
  • 7 Норма количественного анализа на гепатит С
  • 8 Отклонения
  • 9 Плюсы метода
НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Гепатит С — это одно из самых опасных и трудно диагностируемых вирусных заболеваний. Для определения болезни используют метод ПЦР гепатита С. Это новая высокотехнологичная методика, что позволяет исследовать генетический материал на существование жизни в мельчайших частицах (молекулах) и наименьших количествах. Вирус гепатита очень стойкий, он способен долго жить в окружающей среде и отлично приживается в организме человека.

Что такое ПЦР?

Нынче существует огромное количество самых различных болезней. И не меньшее число методов их определения. Так как агенты инфекций научились с легкостью приживаться в окружающей среде и эволюционировать, то чтобы их диагностировать, применяются новейшие технологии. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это более быстрый и точный метод, что направлен на поиск возбудителя заболевания, путем существенного повышения части ДНК вируса гепатита в образце. О нем часто пишут: ищет иглу в стогу сена, а потом из игл строит стог.

Вернуться к оглавлению

Виды метода ПЦР

Качественное тестирование поможет определить присутствие вируса гепатита С в организме.

Выделяют качественный и количественный анализ на гепатит. Чтобы определить, находится ли вирус в организме, и тем, у кого нашли антитела к гепатиту С, проводят качественное тестирование. Расшифровка анализа выдает итог: «положительно»; «отрицательно». Негативное значение означает: либо человек здоров, либо агентов в крови еще недостаточно и их невозможно найти. Поэтому стоит провести повторное исследование через некоторое время.

Положительный результат говорит о существовании инфекции. Это практически всегда точное значение. Ошибочные результаты зависят обычно от человеческого фактора (неправильное хранение или несоблюдение правил проведения методики). Когда норма, итог — отрицательный. Перед проведением тестирования особых правил нет, просто берут кровь с вены.

Ежели нашли, проводят количественный анализ (вирусная нагрузка) — он дает числовые значения: сколько РНК вируса гепатита находится на данное время в установленном объеме исследуемого материала. При активном развитии инфекции ее можно обнаружить на 1−2 неделе у зараженного человека. Обычно исследуют также кровь, потому что агенты в ней свободно циркулируют.

Вернуться к оглавлению

Особенности количественного ПЦР анализа

Количественный ПЦР поможет подобрать наиболее эффективное лечение гепатита С.

Отличием количественного анализа есть то, что не все его проходят. Качественный — определяет наличие, а количественный — помогает с подтверждением заключения «вирус гепатита», прогнозом протекания болезни и определения хода лечения. Насколько эффективна терапия, смотрят по числу РНК до и во время лечения. Также с его помощью определяют назначение доз препаратов.

Вернуться к оглавлению

Показания

Как правило, его производят до начала излечения. Основными показаниями могут быть:

  • определение вирусной нагрузки и контроль за антивирусной терапией;
  • качественный ПЦР нашел антитела гепатита С;
  • нахождение острого и хронического гепатита С;
  • существование микст-гепатитов;
  • при планировании лечения;
  • если качественное исследование еще находит присутствие болезни по прошествии двенадцатой недели терапии.

Также смотрят, какая вирусная нагрузка при гепатите: низкая — терапия проводится успешно; повышенная — лечение не эффективно и его нужно менять.

Вернуться к оглавлению

Для чего проводится на различных этапах течения болезни?

Анализ поможет контролировать результаты терапии на всех стадиях лечения.

На разных фазах заболевания исследование проводят, чтобы дать рецензию пользы лечения и планированию срока его дальнейшего проведения. При хороших ответах на терапию срок ее сокращают. В противном случае, при медлительном уходе вируса, курс лечения продлевают. ПЦР на гепатит делают на 1,4, 12, 24 неделе терапии. Когда показатели не падают по истечении 12 недель, то делают вывод, что терапия не подходит этому организму. Этот анализ используют для установления, насколько активна инфекция и какая вероятность ее передать. Например, при беременности есть риск заразить малыша. После терапии выявляют риск возобновления болезни.

Вернуться к оглавлению

Расшифровка

После проведения исследования расшифровать анализ могут не в цифрах, а словами: «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено». Количественный ПЦР более чувствителен качественного. Вывод «не обнаружено» может говорить, что инфекция не найдена. «Ниже диапазона измерений» — испытание не нашло вирус, но он есть в малой величине. В этой ситуации делают повторное исследование.

Вирусная нагрузка — определение числа инфекционного РНК в установленном объеме крови (количественно 1мл=1куб.сан). Формулируется в интернациональных замерах МЕ/мл. Отдельные лаборатории обозначают копии/мл. Расшифровать перевод компонентов в межнациональные значения различные тест-системы могут по-своему. Таблица 1. Расшифровка количественного анализа РНК вируса

Цифровое обозначение числа вируса, МЕ/мл Описание итога
Не обнаружено Норма для здорового человека. Вирус не найден или исход ниже грани чувствительности методики.
До 1.8*10^2 Обнаружено в концентрации ниже линий границы.
До 8*10^5 Обнаружен вирус при хорошем прогнозе болезни и эффективном лечении. Низкая вирусная нагрузка.
Больше 8*10^5 Обнаружено вирус и большая вирусная нагрузка.
Больше 2,4*10^7 Обнаружен вирус в концентрации выше линейного диапазона.

Вернуться к оглавлению

Норма количественного анализа на гепатит С

Когда человек здоров, норма есть — «не обнаружено». У заболевших людей нормой будет снижение дозы вируса в результатах на логарифмическую единицу, что проявляется убыванием числа нулей в анализе на один (например, с 1*106 МЕ/мл до 1*105 МЕ/мл). Рамки диапазона концентрации вируса, что определяет амплификатор, находятся в границах 1,8*102 — 2,4*107 МЕ/мл. Трактовка исхода:

  • низкая концентрация — от 600 МЕ/мл до 3*104 МЕ/мл;
  • средняя — от 3*104 МЕ/мл до 8*105 МЕ/мл;
  • высокая — выше 8*105 МЕ/мл.

Вернуться к оглавлению

Отклонения

Для определения степени поражения печени назначают биопсию.

При изменениях результатов анализов вне нормы, это может свидетельствовать о возвращении болезни и размножении вируса. На получение недостоверного результата могут повлиять отдельные факторы, например, загрязнение образцов; присутствие в крови гепарина и веществ, замедляющих действие компонентов ПЦР; ошибки лабораторий; несоблюдение правил проведения теста.

Также результат в нескольких лабораториях может различаться, возможно, была другая методика проведения исследований. Чтобы узнать, насколько поражена печень и опасность болезни, недостаточно провести количественный ПЦР гепатита. Дополнительно проходят биохимические процедуры и биопсию.

Планируя лечение, проводят генотипирование вируса. В связи с тем, что гепатит С способен изменяться, существует несколько групп. Для разных типов лечение может отличаться. Бывают ситуации, когда присутствует несколько видов, но анализ находит один, тот, что преобладает. Тогда тест пересдают.

Вернуться к оглавлению

Плюсы метода

Методика ПЦР дает возможность дать заключение и назначить правильное лечение. Плюсы методики:

  • Быстрота результатов — не требует разграничения и выращивания видов возбудителя. Автоматизация процесса позволяет обрабатывать и изучать материал с получением результата за 4−5 часов.
  • Прямота определения возбудителя — найдя особую часть ДНК, прямо указывает на наличие недуга. Например, ИФА — находит белки-маркеры (продукты жизнедеятельности бактерий), что не дает точного подтверждения наличия болезни.
  • Специфичность — исследуется вещество, характерное только для конкретного возбудителя, что исключает реакцию на ложные совместно-реагирующие агенты.
  • Восприимчивость — может обнаружить самое малое количество вируОписание итогаса.
  • Универсальность — основывается на нахождении фрагментов ДНК или РНК конкретных организмов. Это дает возможность провести диагностику для любых агентов из одного биоматериала, если другие методы бессильны.
  • Выявляет не только явные, но и скрытые инфекции — эффективен для изучения агентов трудно выращиваемых, не выращиваемых, стойких.
  • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

Посредством этого исследования провести диагностику могут каждому для удостоверения факта отсутствия болезни. Но для достоверных фактов нужно четко соблюдать инструкции. ПЦР используют в разных отраслях: криминалистике, для установления отцовства, для диагностирования различных вирусов, для выявления аллергии на лекарства, клонировании генов, мутагенезе, секвенирование ДНК.

Диагностика гепатита С с помощью ПЦР РНК — количественный и качественный анализ, расшифровка

Своевременный и качественно проведенный анализ ПЦР на гепатит С позволяет подтвердить или исключить присутствие вируса в организме. Одно из главных достоинств методики — вирус можно обнаружить сразу после заражения, не дожидаясь явных проявлений симптомов заболевания.

Гепатит С вызывается вирусом HCV (hepatitis C virus), содержащим рибонуклеиновую кислоту. Основная опасность HCV — это длительный промежуток времени, который разделяет моменты заражения и появления реакций со стороны иммунитета (от полутора до шести месяцев). ПЦР дает возможность намного раньше определить наличие РНК вируса в крови, поставить точный диагноз, начать лечение.

Варианты анализа

Впервые методика была использована в начале 70-х годов прошлого столетия норвежскими учеными. В ее основе — многократное копирование определенного, относительно короткого участка ДНК вируса при помощи молекул РНК. И сравнивание полученных фрагментов с сывороткой крови человека.

анализ крови

Что такое ПЦР при гепатите? Проводимая полимеразная цепная реакция (ПЦР) показывает:

  • Присутствие или отсутствие вируса;
  • Количественный анализ поражения;
  • Генотип обнаруженного вируса гепатита.

На основе полученных данных определяется степень эпидемиологической опасности (степень инфицирования и риск передачи другим людям), а также прорабатывается последовательность терапевтических мероприятий.

Исследования ПЦР назначаются:

  • воспаленная печеньПри выявлении симптомов воспаления печени;
  • Для профилактических скрининговых исследований;
  • Для обследования в случае доказанного контакта с больным человеком;
  • При диагностировании гепатитов разных классов;
  • Чтобы узнать степень активности вируса при хроническом гепатите;
  • Для оценки адекватности лечения.

Качественный анализ

Качественный ПЦР-анализ позволяет доказать или исключить присутствие ВГС (вируса гепатита С) в биологических жидкостях. Несмотря на то, что качественное исследование может дать только два результата — положительный либо отрицательный, правильно расшифровать данные очень важно.

  1. Положительный. Указывает на присутствие вируса гепатита С в крови. Это значит — пациент инфицирован. Определенный процент оставляют на возможность получения ложного результата. Но постановка диагноза при наличии других симптомов уже возможна.
  2. Отрицательный. Указывает на то, что РНК-вируса в исследуемом биоматериале не обнаружено. Или говорит о маленькой концентрации вируса, невысокой чувствительности теста. Отрицательный анализ тоже бывает ложным.

результат анализаПример качественного анализа ПЦР РНК

Если гепатит развивается в острой форме, то качественный вариант исследования указывает на присутствие вируса в организме уже через 3 недели после заражения.

Количественный анализ

Количественный ПЦР указывает на степень вирусной нагрузки, отображает концентрацию вируса в организме. Исследование дает представление, какое количество фрагментов РНК-вируса содержится в 1 см3 крови.

Результат обозначается по общепринятой системе МЕ/мл — международных единицах на миллилитр. При показателях до 600000 МЕ/мл концентрация вируса считается низкой,среднее значение находится в пределах 600.000-700.000 МЕ/мл, выше 800000 МЕ/мл — высокой.

результаты анализаПример количественного анализа

Количественная диагностика назначается перед началом терапевтического курса и на 12 неделе для определения эффективности выбранного курса терапии.

Метод помогает оценить следующие факторы:

  • Степень инфицирования пациента. При высокой концентрации вируса повышается риск заразить окружение;
  • Правильность выбранной терапии;
  • Длительность лечения и возможный прогноз (при большой вирусной нагрузке терапия длится довольно долго).

Гепатологи отмечают, что уровень концентрации вируса не имеет прямого влияния на тяжесть заболевания. Даже при очень высокой вирусной нагрузке печень может оставаться без серьезных повреждений.

Определение генотипа

Способность к мутации вируса гепатита С очень высока. Поэтому важно определить его генотип перед началом долгого, дорогостоящего лечения. Всего существует 11 генотипов ВГС с большим числом подвидов.

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Тест на генотип позволяет специалистам определить степень устойчивости вируса, подобрать адекватное лечение. Так, 1 генотип требует до 48 недель противовирусной терапии, а 2 и 3 лечатся быстрее и эффективнее (до 24 недель).

генотипы вирусаГенотипы вируса гепатита С

При генотипировании косвенно определяется состояние печени. Например, третьему генотипу свойственно развитие стеатоза — заболевания, при котором наблюдается накопление жира в тканях печени.

Тестовые системы при ПЦР не всегда выявляют тип вируса. Тогда пациент получает результат: «Не типируется». Это означает низкую чувствительность теста или нехарактерный подвид генотипа для географической зоны. Повторное диагностирование с более чувствительной системой позволят определить тип правильно.

Ультрачувствительный анализ

Метод ПЦР с применением гибридизационно-флуоресцентного исследования называется ультрачувствительным анализом (или ультра ПЦР).

Когда используется метод:

  • Если специалист, ведущий заболевание, обнаружил скрытые его формы;
  • При наличии антител к ВГС, не подтвержденных другим методиками;
  • Для подтверждения полного выздоровления после проведенной терапии;
  • Для выявления заболевания на ранней стадии при помощи скрининга.

кровь из вены

Чтобы провести исследование, у пациента забирается венозная кровь. Этот способ дает чувствительность менее 10 МЕ/мл, а это в разы выше, чем при проведении типовых качественных и количественных анализов. Ультра ПЦР назначает гепатолог или инфекционист.

При обычных вариантах исследования возможно получение ложного результата. Это случается, если образцы крови или оборудование загрязнено. Ультрачувствительный анализ позволяет избежать таких ситуаций и облегчить диагностику.

Расшифровка анализов

Для получения адекватных результатов требуется строго соблюдать стерильность образцов биоматериала и условий проведения исследований. Любое отклонение дает неверные данные для аналитики, искажает картину заболевания, затрудняет постановку анализа и выбора правильного курса лечения.

Неточности при проведении анализа ПЦР случаются, поэтому рекомендуется пользоваться комплексным методом исследований.

По окончании лабораторных анализов доступны следующие данные:

  • результаты анализовПоложительный/отрицательный (качественный анализ);
  • Вирусная нагрузка (количество фракций РНК, например, 630.920 МЕ/мл);
  • Номер генотипа HVC, например, 1;
  • Наименование используемого теста, например, Real-time.

Второй пункт традиционно считается наиболее важным. Он показывает степень вирусной нагрузки и является определяющим для выбора лечения.

Особенности

Не пытайтесь самостоятельно расшифровать анализ ПЦР. Его данные могут ввести неспециалиста в заблуждение. Например, качественный тест может быть отрицательным, а иммуноферментный анализ (ИФА), проведенный параллельно — положительным.

Это лишь значит, что вируса гепатита С на данное время в крови человека не обнаружено, но в прошлом у него была острая форма заболевания.

консультация

ИФА указывает на антитела, выработанные организмом после заражения. ИФА используется для первичных исследований, но достаточно надежным его специалисты не считают. Для конечной диагностики обычно выбирают данные ПЦР тестов.

Правила сдачи анализа

Кровь на ПЦР сдают непосредственно в лаборатории. Часто совмещают забор для 2 видов анализов — ПЦР и ИФА.

Чтобы результаты были корректными, требуется выполнение следующих правил:

  • Не принимать никакой пищи и напитков перед анализом;
  • Последний прием пищи должен состояться за 8 часов или более до забора биологического материала;
  • В предыдущий день перед сдачей анализа отказаться от жареной и жирной пищи;
  • Не менее суток перед сдачей не подвергаться физическим нагрузкам.

Метод ПЦР-диагностики считается быстрым и достоверным. Данные результатов можно получить на руки уже через сутки.

Видео

  1. Почему болит печень? Причины и лечение болей в печени
  2. Симптомы и признаки заболевания печени у женщин
  3. Как проводится пальпация печени? Правила процедуры и расшифровка результатов
  4. Компьютерная томография печени — как делают? Подготовка, проведение и расшифровка данных КТ

Анализ ПЦР на гепатит C

Диагностика гепатита включает целый комплекс анализов для определения наличия вируса в крови. Одним из способов обнаружения заболевания является такой метод исследования, как ПЦР на гепатит С. Что это такое, почему анализ ПЦР на гепатит так важен, как его проводят и расшифровывают?

Что это такое

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР, используется для диагностики язвы желудка, колита, энтерита. Но главное ее преимущество заключается в том, что она помогает обнаружить в организме как сам вирус гепатита C, так и антитела к нему, которые обладают способностью не вызывать реакции иммунной системы из-за их способности к мутации.

Исследование и его суть заключаются в создании определенных условий, при которых происходит цепная реакция РНК гепатита. Если при их сопоставлении с нуклеотидной последовательностью вируса гепатита C выявляются совпадения, это свидетельствует о том, что в крови имеются вирусные частицы, а в печени происходят процессы распада. Если количество вируса ниже определенного уровня, выносится отрицательный диагноз, если выше – положительный.

Существует два вида исследования крови методом ПЦР при гепатите: количественный анализ и качественный анализ.

Количественный ПЦР, как упомянуто выше, определяет концентрацию РНК вируса гепатита. Кроме того, он способен дать информацию об интенсивности, с которой развивается патология, и эффективности назначенного лечения. Количественный анализ на гепатит C крайне важен, поскольку фиксирует резистентность к действию противовирусных препаратов и позволяет скорректировать терапию.

После того как больной пройдет курс лечения, ПЦР помогает определить дальнейший порядок назначений. В некоторых случаях выявляется необходимость дополнительных обследований. Например, если уровень АЛП повышен (но не более, чем в 2 раза в течение полугода), а расшифровка анализа указывает на вирусную нагрузку выше 105 МЕ/мл, пациенту назначается биопсия. Если количественный анализ на ПЦР выявляет сильное воспаление и фиброз, больному прописывают курс лечения противовирусными препаратами.

В ситуациях, когда большое количество вирусных частиц сочетается с высоким показателем АЛТ, пациенту незамедлительно должно быть назначено лечение без проведения дополнительных диагностическим мероприятий.

Качественно расшифровать показатели при количественном анализе крови на гепатит могут только квалифицированные и опытные специалисты, а современные технологии помогают сделать это при низкой концентрации вируса в крови.

Качественный анализ ПЦР направлен на определение и подтверждение фактического присутствия вируса в организме. Его проводят при обнаружении в крови антител к гепатиту. Именно качественный анализ на гепатит гарантирует точность результата на 100% и позволяет поставить диагноз на ранних стадиях заболевания, что дает возможность начать борьбу с гепатитом уже в течение первых недель после заражения и повышает шансы на полное выздоровление (в случае с заболеванием типа B).

Преимущества ПЦР

При исследовании методом ПЦР и расшифровке анализа крови на гепатит можно также определить генотип возбудителя заболевания. Всего существует 6 генотипов вируса и большое количество субтипов, однако в нашем регионе распространение получили 1, 2 и 3 генотипы.

Другими преимуществами данного вида диагностики являются:

  • высокая точность полученных показателей и низкая вероятность ошибки в них;
  • высокий уровень чувствительности к вирусным частицам в крови;
  • возможность выявления сразу нескольких возбудителей;
  • диагностика болезнетворных внутриклеточных микроорганизмов, обладающих высокой антигенной изменчивостью;
  • работа с расшифровкой анализа на гепатит позволяет обнаружить скрытые текущие инфекции.

Кому назначают

Анализ ПЦР на гепатит обязательно сдают следующие категории людей:

  • беременные женщины;
  • сотрудники учреждений здравоохранения;
  • потенциальные доноры крови и органов;
  • те, кто имеют характерные признаки заболевания;
  • ВИЧ-инфицированные лица;
  • наркозависимые;
  • лица, ведущие беспорядочную половую жизнь.

Как проводится анализ и требуется ли к нему подготовка

Забор крови для ПЦР-исследования производится из вены. Как правило, это происходит утром до того, как человек поел, поскольку после приема пищи должно пройти минимум 8 часов. В крайних случаях кровь могут взять на исследование днем или вечером, но временной зазор между анализом и приемом пищи должен составлять не менее 5 часов.

Человеческий фактор может количественно отразиться на результатах: их точность в некоторых случаях снижается со 100% до 95%, поэтому к сдаче крови необходимо заблаговременно готовиться. Качество биоматериала для анализа будет соответствующим при следовании пациентом следующим правилам:

  • перед сдачей крови можно пить только чистую воду;
  • за двое суток до проведения исследования нужно отказаться от приема жареной и жирной пищи, а также алкогольных напитков;
  • за сутки до посещения лаборатории следует прекратить прием лекарственных средств. В случае если это не представляется возможным, об этом в обязательном порядке необходимо предупредить лаборанта и лечащего врача;
  • накануне нужно избегать стрессовых ситуаций и физических нагрузок;
  • не следует проходить ультразвуковое, рентгенологическое и инструментальное исследования незадолго до сдачи крови;
  • в течение часа до анализа необходимо воздержаться от курения;
  • за 20 минут до сдачи крови нужно отвлечься, успокоиться и выровнять дыхание.

Если исследование проходит ребенок до 5 лет, родители должны проследить, чтобы он пил кипяченую воду каждые 10 минут в течение получаса до забора биоматериала.

Расшифровка полученных данных

Расшифровка анализа может быть представлена словами (в случае качественного исследования), например, «не обнаружено» или «ниже диапазона изменений». В первом случае, это свидетельствует о том, что инфекция не обнаружена. Во втором – что вирус присутствует, но в незначительном количестве. Такая ситуация требует проведения повторного исследования.

Вирусная нагрузка определяется по количеству инфекционного РНК и обозначается как МЕ/мл или копии/мл.

Нормальным показателем (нормой) количественного анализа на гепатит C является диапазон от 1,8х102 до 2,4х107 МЕ/мл.

Концентрация вируса в крови может быть:

  • низкой: от 600 МЕ/мл до 3х104/мл;
  • средней: от 3х104 МЕ/мл до 8х105 МЕ/мл;
  • высокой: более 8х105 МЕ/мл.

Количественны и качественны анализ ПЦР на гепатит позволяет определить наличие вируса в организме и уровень его концентрации. Полиразмерная цепная реакция способна диагностировать заболевание на ранних стадиях, но для этого необходимо, чтобы больные как можно раньше обращались в медицинские учреждения за помощь и строго следовали рекомендациям лечащего врача.

Добавить комментарий

Ваше имя

Ваш комментарий